【学术前沿】MALDI-TOF细菌分型检测抗生素耐药性

近年来，多重耐药菌的传播已成为全球公共健康的重大威胁，世界卫生组织将其列为当今最严重的公共卫生问题之一。尤其是碳青霉烯类耐药菌的出现，使得临床治疗选择极为有限。

该研究聚焦于三种临床重要病原菌的耐药分析及鉴定，相较传统检测方法（如药敏试验、Carba-NP试验、PCR）存在耗时、成本高、操作复杂等问题，MALDI-TOF质谱法能够可靠且有效地检测细菌质谱图中的特定峰值，这些峰值对应着特定的耐药标志物。

 

测试方法：本研究聚焦于三种临床重要病原菌：产KPC型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、产碳青霉烯酶的脆弱拟杆菌。通过对上述三类菌株采用MALDI-TOF质谱技术的分型模块，在常规菌种鉴定的同时，自动检测特定耐药标志性峰。

 

实验结果：金黄色葡萄球菌临床分离株（共593个）通过MALDI-TOF进行分型，通过检测 m/z 2412 处的特定峰值来实现区分。该峰值对应于一种 PSM-mec 肽，这类肽产物与导致耐甲氧西林现象的机制有关。

 

MALDI-TOF自动检测特定PSM峰（m/z 2411-2419）

a)金黄色葡萄球菌ATCC 33591 （PSM-mec阳性）；b) MRSA临床分离株（PSM-mec阴性）；

c)MRSA临床分离株（PSM-mec阳性）

 

MALDI-TOF检测共684株对碳青霉烯药物敏感性和特异性肺炎克雷伯菌，对抗性菌种kpc峰检测率可达93.9%，对敏感型则100%检测不到该峰。

在产KPC菌株的谱图中存在一个与KPC相关的峰值（位于 11.109m/z），而这一峰值在产 KPC 菌株的质谱图中（下图谱）出现，而在非产 KPC 菌株的质谱图中（上图谱）则未出现。

 

MALDI-TOF检测肺炎克雷伯菌产kpc的敏感性和特异性生物对应率

 

最后通过MALDI-TOF检测后将32（91.4%）株脆弱拟杆菌进一步聚为一类，3（8.6%）株则被归为第二类，常规药敏测试的结果与MALDI-TOF分型相符，与MIC测定相比这使得针对碳青霉烯类药物的反应检测时间缩短了24 - 48小时。

 

结论：MALDI 分型方法在有高正确率识别耐药峰的同时使得报告时间比常规方法大幅缩短，对于产 KPC 的肺炎克雷伯菌而言，可节省 1 至 24 小时，对于耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌而言，可节省 24 小时，对于耐碳青霉烯的脆弱拟杆菌而言，可节省 24 至 48 小时。因此MALDI-TOF药敏分型可在应对耐药菌株分型、抗生素滥用监测等方面发挥优势，加速药敏测定速率。

 

大微数据：

DW-MS 5501可在完成菌株的种属鉴定后，利用耐药菌株和敏感菌株的特征峰差异（包

括蛋白特异峰、同位素标记峰和抗生素水解峰差异等），在鉴定的同时进行二次检索，实现对病原菌药敏的快速筛查。

DW-MS 5501采集金黄色葡萄球菌特征峰图

药敏特征峰列（单次检测最多可以识别6个特征峰）

药敏筛查结果通过一目了然的靶点方形图标和鉴定列表栏中同时标识

 

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