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螺旋平板法——一场微生物快速定量的革新

时间:2021-12-08      浏览:1420

螺旋平板法

螺旋平板法(Spiral plate method)是一种新式微生物快速定量方法,由J.E. Gilchrist、C.B. Donnelly等人最先于1973年提出,主要用于菌落总数测定。

 

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螺旋接种菌落计数是依据阿基米德螺旋原理,使样品以对数规律螺旋线形式接种在平板上。

样品接种后,菌落即分布在螺旋轨迹上,随半径的增加分布得越来越稀。

采用特殊的计数栅格,自平板外周向中央对平皿上的菌落进行计数,即可得到样品中微生物的数量。

 

 

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实验步骤

  1. 取制备好的适宜稀释度的样品稀释液;

  2. 选择模式进行接种;

  3. 将平板按标准方法中规定的培养时间和温度进行培养;

  4. 计数每个平板菌落数,并记录下来。

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螺旋平板法使我们能在培养皿表面接种呈对数递减的曲线。体积是被校准过的,培养皿上每个点的容量都是可知的。计数培养皿指定区域内的菌落数,除以该区域的接种体积,以此可计算出细菌浓度。

 

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经过多年的应用,螺旋平板法已被国外微生物学界普遍认可,被列为美国分析化学家协会(AOAC)的官方方法,也被美国食品药品监督管理局(FDA)国际标准化组织(ISO)列为检测致病菌的标准方法。

 

我国也在《GB 4789.28-2013食品微生物学检验—培养基和试剂的质量要求》《SN/T 2098-2008食品和化妆品中的菌落计数检测方法—螺旋平板法》中对螺旋平板法的实验要求和具体步骤都作了明确规定。

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为什么选择螺旋平板法?

◆ 无需梯度稀释和逐个接种平板,在一块平板上即可产生最大1000倍的浓度梯度

◆ 简化实验步骤,节省操作时间

◆ 节省大量实验材料,节约费用

◆ 样品接种量精确,提高微生物定量实验的准确度

◆ 不会在平板边缘长菌,更易计数

 

微生物学研究结果的可重复性很大程度上依赖于优良的样品制备。螺旋平板法作为一种新式微生物快速定量方法可降低试验成本、提高实验效率,优势突出,应用前景广阔。

 

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杭州大微研发的DW-L2000型全自动微生物平皿螺旋接种仪依据阿基米德螺旋,以递减比率自动接种样本,可实现标准化大量单颗菌落,方便后续菌落计数、菌落分析纯化等实验需求,广泛应用于食品、化妆品、药学实验室等任何微生物实验室。

 

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产品优势:

 接种模式:整合市面所有的接种模式,如指数模式、对数模式、比例模式、微分模式等等,每种模式均以加样半径为横坐标、加样体积为纵坐标,以阿基米德螺旋线为路径进行接种。

 

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√ 无菌保证:专利设计的一次性微量加样头能做到真正无菌取样。无需清洁消毒,杜绝消毒剂残留带来的任何可能的假阴性结果。

 

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 适用性强:特殊设计的加样头缓冲结构,培养基厚度适用范围大,对培养基表面平整度无要求。

 

√ 用途多样:可在单一平皿中产生1000-10000倍(采用150mm平皿)的浓度梯度,免除连续稀释和大量接种过程。除细菌计数外,该仪器也可用于抗菌敏感性测试(AST)和AEMS实验。使用线性模式可改善AMES实验诱变浓度阈值的检测。

 

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