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今日施行!GB 4789.35-2023《食品微生物学检验 乳酸菌检验》标准解读

时间:2024-03-07      浏览:242

2023925日国家卫生健康委发布85项新食品安全国家标准,其中微生物检验方法标准《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》(GB 4789.35-2023)将替代GB 4789.35-2016,于202436日起正式实施。

 

GB 4789.35-2016相比,GB 4789.35-2023主要变化如下:

  1. 修改乳酸菌的定义;
  2. 修改设备和材料;
  3. 修改培养基和试剂;
  4. 修改样品制备内容;
  5. 修改培养条件;
  6. 增加实时荧光PCR方法为选做方法;

 

一、乳酸菌定义:

旧标准描述了乳酸菌是一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌通称,主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和嗜热链球菌。

新标准增加了对乳酸菌生化现象的描述:不能液化明胶、不产生吲哚、革兰氏阳性、无运动、无芽孢、触酶阴性、硝酸还原酶阴性及细胞色素氧化酶阴性反应的细菌。

二、设备和材料:

1、增加样品处理、培养所用的设备和材料:厌氧培养装置(厌氧培养箱、厌氧罐、厌氧袋或能够提供同等厌氧效果的装置)、涡旋混匀仪、恒温水浴锅或金属浴;

2、增加实时荧光PCR法的设备和材料:实时定量PCR仪、离心机、微量移液器和灭菌吸头、PCR管;

3、冰箱温度范围由 2~5℃ 改为 2~8℃;

4、电子天平感量由0.01g调整为0.001g

GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

  • 培养基和试剂
  1. 新标准用稀释液代替旧标准的生理盐水。稀释液主要成分为NaCl和胰蛋白胨;
  2. 修改MRS琼脂培养基和MC琼脂培养基部分成分含量
  3. 增加实时荧光PCR法的试剂DNA提取液、10×PCR缓冲液等。

GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

四、样品制备:

1、增加稀释液预热步骤:稀释液在试验前应在 36℃±1℃ 条件下充分预热15min~30min

2、液体样品处理步骤中,增加拍击式均质器拍打的操作;

3、增加:经特殊技术(如包埋技术)处理的含乳酸菌食品样品应在相应技术/工艺要求下进行有效前处理。

GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

五、培养条件:

1、新标准要求倾注的培养基温度在 48~50℃范围,倾注的量在 15mL~20mL范围。旧标准要求倾注的培养基温度为48℃,倾注的量为15mL

2、新标准根据双歧杆菌、嗜热链球菌、乳杆菌的生长特性,选择36℃±1℃厌氧/需氧培养 48h,若菌落无生长或生长较小可选择延长培养至72h。旧标准双歧杆菌、嗜热链球菌、乳杆菌统一选择36℃±1℃厌氧/需氧培养72h±2h

GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

 

  • 实时荧光PCR法:

旧标准乳酸菌的鉴定(可选做)只有生化鉴定,新标准增加了实时荧光PCR法鉴定,可鉴定常见的干酪乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌和嗜热链球菌,有较高的准确性和特异性,客户可以根据需求选择适宜的检测方法。

GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》

 

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该仪器可根据稀释比例自动加入稀释液无需人为计算自动完成对任意重量样品的准确稀释,使工作简易化稀释液经过可灭菌分液管路,避免稀释液污染和样品污染。仪器可用于乳酸菌检验中的样本前处理自动稀释。

 

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无菌保证:采用分液管与分液泵分离的设计,使流体只经过可灭菌的分液管,杜绝污染可能。

 

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该系统可为各类厌氧/微需氧微生物(双歧杆菌、产气荚膜梭菌等)提供最适所需的气体培养环境,微需氧最快2min,满足食品安全、乳制品研究、益生菌制品等领域各种微生物培养需求;可应用于益生菌活菌计数、耐氧菌驯化选育、不同氧环境平行条件探究等。

 

产品优势:

一机多用:厌氧、微需氧和嗜CO2培养;

快速生成环境:微需氧最快2min,厌氧最快4min

罐体灵活配置:多种罐体可选,满足不同培养需求;

QA质控软件:培养前5级质控检测,确保重现性100%

 

DW-V系列 全自动菌落计数仪

 

仪器可自动对微生物菌落进行快速读数和统计,提高统计效率,减少人为误差,还可实现对微生物平皿上所有菌落的高通量表型分析,广泛应用于食品、乳制品、饮用水、疾控中心等微生物实验室。

 

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平板选择:支持倾注平板、涂布平板、膜滤平板、3M测试片等多种平板;

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数据安全:可设置不同级别操作者的使用权限、数据修改权限,符合HACCPGLPGMP等质量体系管理要求;

软件升级:具备偏差统计、全皿测量、杂质剔除、网格清除、颜色分类、人工修正、排除污染、参数换算等。

 

DW-M80型 自动微生物生化鉴定系统

 

仪器通过生化反应原理捕获细菌生化表型特征对微生物进行鉴定,可用于GB 4789系列要求的食源性致病菌的分离鉴定和《国家食源性疾病监测工作手册》要求的食源性致病菌的耐药分析,可鉴定550种以上常见微生物,满足乳制品中益生菌鉴定需求,广泛运用于食品安全、市场监督管理部门、疾控等微生物实验室。

 

产品优势:

数据库庞大:包括菌种表型信息库2000种以上,可鉴定食源性致病菌和临床致病菌500种以上;

结果可靠:细菌生化鉴定一致性95%以上;药敏实验结果符合率95%以上;

灵活运用:配置智能化鉴定专家系统,自动识别异常细菌表型;一块试剂板可完成鉴定、药敏双试验。

 

DW-MA6000型 实时荧光定量PCR

 

仪器基于多重荧光探针PCR检测技术原理,可将待检标本核酸与反应液混匀后直接分装加样到多重PCR反应板条中,瞬间离心后即可上机检测,一分钟加样完成最多24种靶标基因检测。

 

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光学检测:全球领先光学传导和采集技术,利用光纤将无衰减地将能量传导至每一个反应孔和冷态CCD,从物理属性上保证激发和检测时的一致性和真实性,大大提高灵敏度。

人机友好:实时监控,自动判别阴阳性结果,建立标准曲线,绝对/相对定量,多重定量,熔解曲线等。

 

检测项目:

沙门氏菌、牙龈卟啉单胞菌、椰毒假单胞菌、致泻大肠埃希氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、单核细胞增生李斯特菌、阪崎肠杆菌、产气荚膜梭菌

 

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