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军团菌为革兰氏阴性杆菌,其适宜生长温度为34℃-54℃,在自然条件下可长期存活于水中。据了解,当前已分离出30多种军团杆菌,至少19种是人类肺炎的病原,其中最常见的为嗜肺军团菌,占比达85%-90%,平均每10个军团菌感染者中就有1名患者死亡。
嗜肺军团菌
军团菌最常见的传播方式是吸入受污染的气溶胶,气溶胶的来源有很多,比如空调制冷塔、热冷水供应系统、喷泉、水疗中心以及某些医疗设备。其中导致军团菌病暴发的“主犯”是空调系统,气溶胶经空调机入口或通风管道进入室内,经呼吸道进入肺泡而引起感染暴发。因此,对于长期使用空调、或接触以上可能被军团菌污染的水源时,出现肺炎的症状,需要考虑是否有军团菌感染的可能。
随着我国城市化水平的提高,空调及供水系统普及,嗜肺军团菌的检测对预防军团菌病的暴发和流行无疑具有重要意义。
《GB/T 40392-2021 循环冷却水中军团菌的检测》中提到,将样品接种GVPC琼脂后,在2.5%CO2,36℃±1℃,相对湿度≥95%的环境下培养10天,并在第3天开始检查培养皿,在培养期结束时进行最终检查,记录可疑军团菌菌落数量,可疑菌落分别接种BCYE和BCYE-Cys培养基上进行验证。
《GB/T 40392-2021 循环冷却水中军团菌的检测》
杭州大微-嗜肺军团菌检测全流程方案:
第一步:样本制备
DW-28系列 水中微生物膜过滤装置
仪器是对“包含少量微生物污染”水样进行微生物检测的新一代仪器,用于食品、化妆品、环境监测等水中微生物质量控制,
系统材质:全不锈钢材质过滤系统,更耐高温耐腐蚀;
创新方式:支持单个样品过滤,也支持多个样品过滤,在检测大量样品时可节省大量时间;
灭菌保证:湿热灭菌、干热灭菌、火焰灭菌等多种符合认证的灭菌方式。
第二步:培养基制备
DW-9系列 微生物试剂分液器(自动培养基分装器)
一机多用,1台设备可实现“倾注平板制备”和“试管分装”等多种用途。在定量分装培养基时,设备可实现培养基定量、批量分装,实现培养基制备的标准化、可重复化。
自动分装:可按需编程单次分装总量、分装次数等信息,实现循环自动分装;
选择多样:配备不同直径分液管,可分装培养基、缓冲液和稀释液等多种微生物试剂,保证分液精度;
无菌保证:采用分液管与分液泵分离的设计,使流体只经过可灭菌的分液管,杜绝污染可能。
第三步:涂布接种
DW-16型 自动细菌涂布接种仪
专为微生物实验中的“细菌涂布接种”环节而设计,可实现细菌涂布标准化。
自动涂布:电机驱动,自动旋转涂布菌液,可调节转速;
涂布标准:细菌生长均匀,避免手工接种的细菌生长不均匀和菌落重叠现象,方便菌落计数;
无菌保证:可使用消毒剂以及紫外线灭菌。
第四步:培养
DW-100A-K系列 智能厌氧微生物培养系统
仪器服务于国家标准所需的厌氧、微需氧和嗜CO2微生物培养,可根据需要选择特定氧气浓度和CO2浓度,快速生成培养环境,稳定可靠,确保重现性100%,使用DW-100A-K可保证培养环境严格稳定在军团菌的最适环境。
一机多用:厌氧、微需氧和嗜CO2培养;
快速生成环境:微需氧最快2min,厌氧最快4min;
罐体灵活配置:多种罐体可选,满足不同培养需求;
QA质控软件:培养前5级质控检测,实现培养过程的标准化和可重复。
第五步:菌落计数
DW-V系列 全自动菌落计数仪
仪器用于微生物菌落的快速读数和统计,全自动运行,支持多种菌落形态的自动统计。同时软件具备智能识别技术,可对平皿上所有菌落进行高通量表型分析,包括菌落大小、圆度、表型形态、边缘特性等。
平板选择:支持倾注平板、涂布平板、膜滤平板、3M测试片等多种平板;
计数模式:8种自动计数模式,包括较大菌落、中型菌落、微小菌落、灰白菌落、蔓延菌落、多色混杂菌、霉菌等;
数据安全:可设置不同级别操作者使用权限、数据修改权限,符合HACCP、GLP、GMP等质量体系管理要求;
软件升级:具备偏差统计、全皿测量、杂质剔除、网格清除、颜色分类、人工修正、参数换算等。
第六步:生化鉴定/质谱鉴定
DW-M80型 自动微生物生化鉴定系统
仪器通过生化反应原理捕获细菌生化表型特征对微生物进行鉴定,可鉴定550种以上常见微生物,实时出具微生物鉴定报告,节省人工时间。
数据库庞大:菌种信息库2000种以上,可鉴定食源性致病菌和临床致病菌500种以上;
结果可靠:细菌生化鉴定一致性95%以上;药敏实验结果符合率95%以上;
灵活运用:配置智能化鉴定专家系统,自动识别异常细菌表型;一块试剂板可完成鉴定、药敏双试验。
DW-MS 5500型 飞行质谱微生物快速鉴定系统
仪器通过MALDI-TOF质谱仪测得待测微生物的蛋白质指纹图谱,并和数据库中的标准指纹图谱进行比对,完成快速鉴定。与传统微生物鉴定技术相比,具有操作简单、快速、通量高、灵敏度高、准确度好、试剂耗品经济等优势。
鉴定速度快:1个菌落样本,仅需10分钟;
鉴定范围广:>7400菌株(4000+物种),涵盖厌氧菌、真菌、高致病菌等,不断更新;
操作更简单:挑选单菌落涂抹至靶板,然后加基质液上机检测即可。
军团菌病目前并没有相应的疫苗,预防军团菌感染的主要策略,是控制军团菌在空气与水体中的增殖、减少气溶胶的产生。主要应采取以控制空调系统冷却塔和热水系统中军团菌污染为主的预防措施,同时加强人群自我防护。