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在微生物样品的重量稀释里,“精准”到底有多重要

时间:2022-06-10      浏览:695

重量稀释通常是微生物检测的第一步,重量稀释后得到样品的初级混悬液,混匀均质让样品中的微生物尽可能均匀分布,然后进行后续的梯度稀释、分离培养等步骤。可以说重量稀释是整个检测环节中的基础。

在国家标准里,重量稀释的环节通常由无菌吸管或微量移液器及吸头完成,样品通过称取一定重量后或量取一定体积后,加入9倍重量或体积的特定稀释液,经过外力作用充分均质混匀后,得到悬浊液、溶液或者乳浊液。

GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》

GB 4789.13-2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验》

 

在重量稀释过程中,对样品及稀释液的定量控制为人工操作完成,以移液器等工具作为辅助。但在操作过程中因液体挂壁、称重不精准等原因容易产生误差,这类细微误差难以在当下被迅速纠正,但其结果往往会在最终得以展现。

 

 

接下来我们就举个例子说明在重量稀释过程中「精确」的必要性。

 

我们首先用天平称量25 g样品,然后量取225ml稀释液,但实际上准确量取225ml比较困难,常见的情况是多量取或少量取1、2ml稀释液,而在实际操作过程中,这些误差都会被忽略。

 

比如我们实际量取了226ml稀释液,然后照常进行操作,在菌落计数时得出结果为200 CFU,因此计算样品中的菌落总数为2*107CFU/mL,但实际的结果应该是2.01*107 CFU/mL,此时误差值为1*105 CFU/mL。

这是只考虑到了量取稀释液时的误差情况,但在称量样品时也容易产生细微误差。比如我们实际称量了24.8g样品,在量取稀释液时也出现了误差,实际量取了226ml,在菌落计数时得出结果为200 CFU,计算后得到结果为为2 *107 CFU/mL,但若是我们将误差考虑进去,实际结果应是 2.02*107 CFU/mL(226 ml),此时的误差值为2*105 CFU/mL。

 

 

对重量稀释来说,只有在样品称量、稀释液量取等环节都做到准确,才能为后续的梯度稀释、分离培养打好基础,确保最终结果的可信度。从这个角度来说,重量稀释环节是「失之毫厘,谬以千里」的体现。

 

为了避免传统人工操作中容易出现的误差问题,杭州大微推出DW-JURAY系列微生物样品自动重量稀释仪。当样品袋内样品重量不确定时,仪器可根据稀释比例自动加入稀释液,无需人为计算。同时仪器有双泵进样模式可选,双管同时注液,缩短稀释时间,提高效率。

仪器符合《GB 4789-2016食品安全国家标准食品微生物学》、国际标准 ISO 9001、ISO 6887-1、ISO 7218、COFRAC标准,仪器广泛用于食品、药品、化妆品等含微生物样品的前处理自动稀释。

 

产品优势:

智能计算:无需人工计算,可根据稀释比例自动加入稀释液,提高效率;

灵活运用:仪器仅重6.5kg,支持在实验室随时搬运;可通过触摸面板指令进行编程设置,定制稀释程序,简化仪器操作;

可追溯性:实验数据存于内置微处理器,可导出包括日期、时间、样本重量、稀释因子、稀释液编号等在内的信息记录;

无菌保证:稀释液只经过可灭菌分液管路,避免稀释液污染和样品污染。具备可拆卸托盘,方便清洗。

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