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DW行业解决方案|化妆品中微生物质量控制检验

时间:2023-09-21      浏览:1239

 

一.目的

用于化妆品微生物指标(菌落总数、霉菌和酵母总数、耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)检测;

二.参照标准及微生物限量

本方案参照国家食品药品监督管理总局批准颁布的《化妆品安全技术规范》2015版和2022版征求意见稿、SN/T 2098-2008 《食品和化妆品中的菌落计数检测方法-螺旋平板法》

 

三.组成部分

本方案提供化妆品微生物指标检测所需仪器和培养基及其他试剂。

四.检测流程及方案

流程解读

1.样品采集

2.样品前处理

2.1液体样品:用吸管手动吸取或用自动重量稀释仪自动称重稀释,均质器自动均质后制成1:10检样。按需进行梯度稀释。

2.2 油性液体样10g样品+5mL灭菌石蜡油混匀+10ML灭菌吐温80

40℃-44℃水浴振荡10min+75ML灭菌生理盐水(40℃-44℃预温),乳化后制成1:10的悬液。按需进行梯度稀释。

2.3 膏、霜、乳剂半固体状样品

2.3.1  亲水性样品:10g样品+ 90ML灭菌生理盐水,均质 1min—2min,静止取上清,上清为1:10匀液。按需进行梯度稀释。

2.3.2  疏水性样品: 10g样品+ 10mL 灭菌液体石蜡 + 10mL 灭菌吐温 80 + 70mL 灭菌生理盐水,均质 3min—5min,制成 1:10 检液。按需进行梯度稀释。

2.3.3  固体样品:称取 10g+90mL 灭菌生理盐水,均质 3min—5min,充分均质混匀,静置后,取上清液作为 1:10 的检液。

总结:化妆品根据与水分子的亲和性及性状的不同,具有不同的类型,包括疏水性样品和亲水性样品以及液体样本和固体样本,相关标准规定不同类型的样品取10g/10mL经过不同的前处理,最终形成1:10的检液。其中,亲水性样本一般选择生理盐水进行稀释,而油性液体样本或疏水性样本稀释液除生理盐水以外,还需添加一定体积的非离子型表面活性剂(如tuwen80)与液体石蜡混合用于样品的乳化过程,从而使微生物更均匀的分散,以便于其检出。此过程一般可通过重量稀释仪和均质器实现。

3. 样品接种

根据化妆品技术规范需要倾注法接种样品,但此法对操作人员的要求较高,而涂布法操作难度低,可预先倒置相关微生物检测的培养基平板,用自动细菌涂布仪涂布接种,上样量可调至100微升。此外,根据SN/T 2098-2008 《食品和化妆品中的菌落计数检测方法-螺旋平板法》,化妆品中菌落计数还可选择螺旋接种法。

4. 样品培养

细菌用恒温培养箱培养,霉菌和酵母菌用霉菌培养箱,培养条件根据微生物种类的不同而不同

 

 

 

 

2 不同微生物指标检测培养条件

微生物种类/

检测指标

培养条件

温度

时间

菌落总数

36℃±1℃

48h±2h

耐热大肠菌群

44.5℃±0.5℃/36℃±1℃

24h±2h/18h-24h

铜绿假单胞菌

36℃±1℃

18h—24h

金黄色葡萄球菌

36℃±1℃

24h±2h

霉菌和酵母菌

28℃±2℃

5d

 

5.样品检测

微生物定量检测用全自动菌落计数仪实现菌落计数,如样品中菌落总数的测定、霉菌及酵母菌总数;微生物定性检测用自动微生物生化鉴定系统实现,如铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的定性。

五.产品信息

 

3 化妆品微生物指标检测相关设备列表

序号

设备名称

推荐型号

推荐品牌

1

重量稀释仪

DW-JURAY

杭州大微

2

拍击式均质器

DW-4

杭州大微

3

微生物试剂自动分装仪

DW-9

杭州大微

4

全自动微生物螺旋接种仪

DW-L2000

杭州大微

5

自动微生物涂布接种仪

DW-16

杭州大微

6

全自动革兰氏染色仪

DW-GS100

杭州大微

7

细菌麦氏浊度仪

DW-MF30

杭州大微

8

自动微生物生化鉴定系统

DW-M80

杭州大微

9

全自动微生物菌落计数仪

DW-V9

杭州大微

10

恒温培养箱

BPMJ-150F

上海力康

11

霉菌培养箱

BPH-9162

上海力康

12

水浴振荡器

HTS-10

上海赫田

 

 

4 化妆品微生物指标检测相关培养基

 

序号

检测指标

培养基名称

规格及货号

推荐品牌

1

细菌总数

TTC卵磷脂、吐温 80

营养琼脂

250g/,

HB5189

青岛海博

2

耐热大肠菌群

双倍乳糖胆盐(含中和剂)

250g/瓶,

HB8593

青岛海博

3

伊红美兰(EMB)琼脂

250g/瓶,

HB0107

青岛海博

4

胰蛋白胨水

250g/瓶,

HB5218

青岛海博

5

铜绿假单胞菌

SCDLP 液体培养基

250g/

 

广东环凯

6

十六烷基三甲基溴化铵培养基

9cm*10/包,

HBPM5184

青岛海博

7

营养琼脂

250g/瓶,

HB0109

青岛海博

8

金黄色葡萄球菌

SCDLP 液体培养基(见上)或

7.5%氯化钠肉汤

250g/瓶,

HB4119

青岛海博

9

Baird Parker 平板

250g/瓶,

HB4115

青岛海博

10

 

亚碲酸盐卵黄增菌液(Baird Parker 平板添加剂)

5ml*10

HB4116-1

青岛海博

11

霉菌及酵母

孟加拉红琼脂培养基

250g/瓶,HB0237-2

青岛海博

 

5 化妆品微生物指标检测相关试剂

序号

试剂名称

用途

规格及货号

推荐品牌

1

氯化钠

样品前处理稀释

500g/

国药

2

吐温80

样品乳化剂

100ml/瓶,9005-65-6

 

biosharp

3

无菌液体石蜡

样品前处理

1.7ml*20

GS070

青岛海博

4

Kovacs氏靛基质试剂盒

耐热大肠靛基质实验

5ml*2/盒;HB8279

青岛海博

5

革兰氏染色液

细菌染色

500Ml/瓶,3瓶/套

杭州大微

 

 

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